Latin American & Caribbean Aquaculture 2024

September 24 - 27, 2024

Medellín, Colombia

AISLAMIENTO, IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE Edwardsiella anguillarum CAUSANTES DE BROTES INFECCIOSOS EN TILAPIA DEL NILO Oreochromis niloticus CULTIVADA EN MÉXICO

Eduardo Martinez-Matus1,2,3*, César Ortega4, Beatriz Cámara-Herrera3, Ruben Avendaño-Herrera1,2

 

1Laboratorio de Patología de Organismos Acuáticos y Biotecnología Acuícola, Facultad de Ciencias de la Vida, Universidad Andrés Bello, Viña del Mar, Chile. Email: ravendano@unab.cl                                                                  

2Centro Interdisciplinario para la Investigación en Acuicultura (INCAR), Universidad Andrés Bello, Chile.

3Centro de Biotecnología DAL, Universidad Técnica Federico Santa María, Valparaíso, Chile.

Email: emartinezm@usm.cl; beatriz.camara@usm.cl

4Centro de Investigación y Estudios Avanzados en Salud Animal, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Autónoma del Estado de México, Toluca, México. Email: cos_mx@hotmail.com

 



Edwardsiella anguillarum es un bacilo Gram negativo, flagelado e intracelular facultativo, considerado un patógeno emergente para la acuicultura mundial. Posee un amplio rango de hospederos, afectando a peces cultivados en ambientes marinos o dulceacuícolas. Su presencia ha sido reportada en Asia, Europa, África y América, incluyendo dentro de este continente a Estados Unidos, Costa Rica, Perú, Colombia y Brasil. En este estudio ampliamos la distribución de E. anguillarum, aislando, identificando y caracterizando cuatro aislados recuperados de mortalidades ocurridas en dos cultivos de tilapia (Oreochromis niloticus) de distintas regiones de México.

En noviembre de 2021 se registró un evento de mortalidad en una granja de tilapia en el estado de Querétaro, seguido por otro brote en el Estado de México en 2022. Con el fin de determinar la causa del brote se muestrearon cinco peces con nado errático, pérdida de coloración y anorexia. A partir de cada uno de ellos se sembraron muestras de hígado, bazo y riñón en agar Infusión Cerebro Corazón (BHI), incubándose a 28°C por 72 h. Se obtuvo crecimiento de colonias puras en las muestras del bazo de 2 de las 5 tilapias enfermas provenientes de ambos brotes. La identificación taxonómica se realizó inicialmente mediante la secuenciación del gen 16S ARNr. La amplificación del 16S ARNr clasificó los aislados dentro de las especies Edwardsiella, específicamente E. piscicida y E. anguillarum. Luego, con el fin de establecer con exactitud el agente causante de las mortalidades se analizaron los genes constitutivos gyrB y sodB. El análisis filogenético de cada gen y el concatenado posicionó a todos los aislados como pertenecientes a E. anguillarum. Además, se realizó una caracterización fenotípica y bioquímica completa usando métodos convencionales y miniaturizados API® ZYM, API® 20E y API® 50 CH (Biomérieux). Los aislados crecieron en un rango de temperatura de 15 a 37°C, a salinidades de 0 a 3% y pH entre 5 a 9. Se evidenció la hidrólisis de esculina y Tween 20. Los cuatro aislados presentaron características bioquímicas idénticas en las galerías API, siendo positivos para fosfatasa alcalina, ornitina descarboxilasa, producción de indol y H2S, D-glucosa, D-manitol, D-ribosa y gluconato de potasio y negativos para Voges-Proskauer, trehalosa, lactosa y L-fucosa. Finalmente, se realizó la tipificación para determinar la existencia de diversidad intraespecífica usando ERIC-PCR, REP-PCR y RAPD-PCR. Los resultados, independiente de la técnica, muestran un patrón clonal en los aislados estudiados. En base a todos los resultados previos, confirmamos la presencia de E. anguillarum en México, ampliándose la distribución geográfica del patógeno.

Este estudio fue financiado por FONDAP-ANID 1523A0007 y ANID Chile 21232432.