Latin American & Caribbean Aquaculture 2024

September 24 - 27, 2024

Medellín, Colombia

MORFOLOGÍA Y ULTRAESTRUCTURA ESPERMÁTICA EN SEMEN FRESCO Y CRIOCONSERVADO DE YAMÚ Brycon amazonicus

Barros-Barrios, OJ1*; Guaje-Ramírez, DN1; Gómez-Ramírez, E2; Medina-Robles, VM1.

1Grupo de Investigación sobre Reproducción y Toxicología de Organismos Acuáticos, Instituto de Acuicultura y Pesca de los Llanos – IALL, Universidad de Los Llanos, Villavicencio, Colombia

2Grupo de Ecotoxicología, Evolución, Medio Ambiente y Conservación, Universidad Militar Nueva Granada, Cajicá, Colombia

E-mail: owens.barros@unillanos.edu.co

 



La crioconservación seminal de peces, es una técnica que permite almacenar germoplasma por largos periodos de tiempo, por esta razón, tiene potencial para desacelerar la perdida de la biodiversidad y establecer programas de mejoramiento genético en especies de interés comercial como el yamú. Sin embargo, esta técnica puede causar daños en las membranas plasmáticas debido al estrés tóxico y osmótico al que son sometidos los espermatozoides durante los protocolos de congelación . El objetivo de este trabajo fue evaluar las anormalidades espermáticas tanto en semen fresco (SF) como crioconservado (SC) 24 horas, 1 mes y 3 meses, y la ultraestructura de espermatozoides de B. amazonicus. La investigación se llevó a cabo en el Laboratorio de Reproducción y Crioconservación del Instituto de Acuicultura y Pesca de los Llanos. Ocho machos sexualmente maduros (1,21±0,1 Kg), se indujeron con extracto de hipófisis de carpa (4 mg/Kg), y a las 18 horas posteriores, el semen con una movilidad >90% fue diluido en una proporción 1:4 en una solución de glucosa (5,5%), yema de huevo (12%) y DMSO (10%), empacado en macrotubos de 5 ml y congelados en vapores de nitrógeno líquido (-70°C) durante 30 minutos, posteriormente fueron sumergidos en tanques a -196°C y evaluados en los tiempos mencionados. Para identificar las anormalidades espermáticas se usó la tinción Rosa de Bengala; y para la ultraestructura se siguieron los protocolos para microscopía electrónica de transmisión. El SF presentó menos anormalidades (12,38% ± 3,2%) con respecto a los tratamientos de SC (p<0,05). No hay diferencias estadísticamente significativas entre los tiempos de crio-almacenamiento, sin embargo, el SC almacenado por 3 meses fue el que presentó un mayor porcentaje de anormalidades espermáticas (51,75% ± 10%). La anormalidad espermática más encontrada en todos los tratamientos fue la cabeza irregular, y aunque en SF fue menor, no se presentaron diferencias estadísticamente significativas entre los tiempos de congelación. A los 3 meses de crioconservación se observó una mayor cantidad de número de cabezas espermáticas libres (10,62% ± 5,31 %) con respecto a los otros tratamientos (p<0,05). Para la ultraestructura, se observó que los espermatozoides de B. amazonicus tienen una cabeza oval espermática sin acrosoma, pieza media y un solo flagelo. La cabeza está envuelta por una bicapa de membrana plasmática y en el núcleo, se evidenció copioso material electrodenso repartido de forma homogénea. El flagelo se inserta en la parte posterior de la cabeza formando una invaginación en la pieza media, donde se alojan de 2 a 4 mitocondrias. Al corte transversal del flagelo se muestra un arreglo de microtúbulos en el axonema de 9+2. Se evidenció que la crioconservación causa aumento en las anormalidades espermáticas y daño en las membranas de algunos de los espermatozoides, por lo que se es necesario estudiar el uso de sustancias antioxidantes para mejorar la calidad seminal postdescongelación.