Latin American & Caribbean Aquaculture 2024

September 24 - 27, 2024

Medellín, Colombia

RESPUESTA ANTAGONICA IN VITRO DE LAS CEPAS Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis y Brevibacterium casei FRENTE AL Streptococcus agalactie

Camilo Lenin Guerrero Romero*a, Marcelo Leandro Delgado Gelpud a

Diana Elizabeth García Rodríguez a, Marco Antonio Imués Figueroaa, Luis Evert Enriquez Benavidesa

 

a Programa de Ingeniería en Producción Acuícola – Universidad de Nariño. Calle 18 Cr 50 Ciudadela Universitaria Torobajo, Pasto, Nariño, Colombia.

 

*Corresponding author:

Camilo Lenin Guerrero Romero

E-mail address: camiloguerrero.udenar@gmail.com-mailto:levenbenavi@gmail.com

Current address: Universidad de Nariño.  Torobajo, Calle 18 Carrera 50, Pasto, Colombia

 



La tilapia nilótica (Oreochromis niloticus) es una especie acuícola de gran importancia económica, susceptible a infecciones por Streptococcus agalactiae. Este estudio evalúa la capacidad in vitro de Bacillus thuringiensis para inhibir el crecimiento de S. agalactiae mediante productos extracelulares (PECs) y antagonismo. Los resultados demuestran que los PECs de las cepas bacterianas evaluadas presentan un efecto inhibitorio sobre S. agalactiae, siendo B. thuringiensis la cepa con mayor actividad antagónica. Estos hallazgos sugieren el potencial de B. thuringiensis como agente probiótico para el control de S. agalactiae en la producción de tilapia nilótica.

 

Obtención del material biológico. Las bacterias se obtuvieron del tercio medio del tracto intestinal de tilapia nilótica (Oreochromis niloticus). Actividad antibacteriana mediante productos extracelulares (PECs). Para la obtención de los PECs, se inoculó en caldo TSB e incubó hasta la fase exponencial final de las cepas con potencial probiótico y se procedió a centrifugar a 3500rpm durante 20 minutos; para el ensayo, se dispuso una relación 1:1 de PECs de cada cepa bacteriana objeto de estudio y cepa patógena (S. agalactiae ATCC® 13813™) previamente cultivada en caldo BHI, en tubos de ensayo. Se valoró mediante espectofotometro Thermo – Genesys, registrando la absorbancia a 600 nm en intervalos de 0, 4, 8 y 12 horas. Antagonismo. Del proceso anterior de centrifugación, se obtuvo la masa biológica la cual, fue resuspendida en solución salina estéril. Cada unidad experimental estuvo conformada por una caja Petri conteniendo agar BHI. En esta se sembró cada concentración de cepa patógena y, una vez realizados los pozos, se vertió en cada uno de ellos la concentración relativa de las cepas investigadas (Tabla1). Identificación. La identidad de las cepas fue confirmada a través de secuenciación de la sub-unidad 16s ribosomal. Análisis estadístico.  Se aplico diseño factorial, y cumplidos los supuestos estadísticos, se hizo prueba post hoc de Tukey. Resultados y discusión.  La actividad antibacteriana, indica que los PECs de los diferentes morfotipos inhiben el crecimiento de la cepa patógena, en comparación con el control (Tabla2). Por su parte, la cepa con mayor actividad antagónica fue B. thuringiensis (T2-1) a concentración de 1x107 UFC/mL, frente a 1x106 UFC/mL de la cepa patógena y generó un halo de inhibición superior en comparación a los otros tratamientos (Fig 1). Conclusiones. Los PECs de cada cepa bacteriana lograron un efecto inhibitorio del crecimiento de S. agalactiae. Entre las cepas evaluadas, B. thuringiensis presentó mejor respuesta antagónica frente a S. agalactiae presentando un mayor halo de inhibición. Por lo tanto, al cumplir con el objetivo frente a la inhibición del patógeno, este tipo de bacterias pueden ser empleadas en una prueba in vivo a fin de corroborar su efecto en la producción de tilapia nilótica