La harina de la lombriz de tierra, Eisenia fetida, ha sido utilizada como sustituto o complemento alimenticio en dietas acuícolas, sin embargo, el sustrato donde es cultivada provoca variaciones en su contenido proximal. El objetivo del presente estudio fue evaluar la inclusión dietética (5, 10 y 20%) de harina de E. fetida cultivada en dos sustratos (vegetal, CV; animal CA), en el crecimiento, supervivencia y actividad enzimática de juveniles del camarón blanco Litopenaeus vannamei (2.29 ± 0.13 g). El experimento se realizó en condiciones de laboratorio durante 75 días. El sustrato vegetal estuvo constituido por desechos orgánicos de cocina, mientras que el sustrato animal consistió en estiércol de ovino. Se analizaron la composición proximal y el perfil de aminoácidos de la harina de lombriz y de las dietas experimentales. Los camarones alimentados con 10% CV registraron un mayor peso final (8.07 ± 0.39 g) y ganancia en peso (5.66 ± 0.45 g) (p<0.05) al final del experimento. El peso final, peso ganado y crecimiento específico fueron mayores en los organismos alimentados con CV, indiferentemente del nivel de inclusión. La supervivencia fue similar (˃ 90%) en todos los tratamientos (p˃0.05). Con excepción de la lisina, el contenido de aminoácidos esenciales y no esenciales se incrementó con el nivel de sustitución de la harina de lombriz obtenida con ambos sustratos. La inclusión de 10% de harina de lombriz en ambos sustratos mostró la mayor actividad de proteasas (39.83 ± 3.0 y 50.87 ± 4.4 U/mg en CV y CA, respectivamente). mientras que la mayor actividad de la quimotripsina se observó en el grupo 5% CA (30399.99 ± 2131.2 U/mg). Los resultados indican que la inclusión dietética de la harina de E. fetida producida en CA y CV, afectaron el crecimiento y actividad enzimática del camarón blanco sin comprometer su supervivencia. Estudios posteriores con este ingrediente en dietas formuladas para L. vannamei deben ser realizados con cautela en función del sustrato en el que se produce la lombriz.