Latin American & Caribbean Aquaculture 2019

November 19 - 22, 2019

San Jose, Costa Rica

EFECTO DEL LIPOPOLISACÁRIDO (LPS) y POLI I:C EN CULTIVOS PRIMARIOS DE CÉLULAS DE ROBALO Eleginops maclovinus y SALMÓN DEL ATLÁNTICO Salmo salar

Daniela Nualart* ,  Francisco Dann , Luis Vargas-Chacoff.
 Instituto de ciencias Marinas y Limnológicas, Universidad Austral de Chile, Valdivia, Chile.
Centro FONDAP-IDEAL, Universidad Austral de Chile, Valdivia, Chile
 Email: daniela.nualart@gmail.com
 

Existen  moléculas que se encuentran abundantemente en la membrana externa de las bacterias gram  negativas o presentes en virus como (Poli I:C) , además de proteínas recombinantes obtenidas en sistemas bacterianos o extractos proteicos de ectoparásitos, que contienen lipopolisacáridos (LPS) y su presencia  puede afectar el comportamiento de las células  de los tejidos . El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del LPS  y Poli I:C sobre  cultivo  primario de  células de riñón de Salmo salar " salmón del Atlántico" y E. maclovinus "robalo" . Para esto,  las células  se estimularon LPS  y Poli I:C, durante una cinética que fue de 30 min, 1, 3, 6, 12, 24 y 48hr .  La expresión de marcadores  inmunológicos se evaluó mediante qRT-PCR y adicionalmente se monitoreó su morfología  mediante microscopía invertida. Al evaluar la expresión  génica  de TLR-8  e IgM  en  células de riñón de E. maclovinus estimuladas con Poli I:C se observó un aumento a los 30  min y a 1 h post-estímulo y en cambio al tratar dichas células con LPS sólo se incrementó a 1 hora post-tratamiento. Para S. salar la expresión de TLR-8 e IgM el incremento fue a  las 3 horas para ambos estímulos .  Para  el caso de MHC II  la expresión en robalo aumentó  desde los 30 minutos a las 3 horas cuando las células  fueron expuestas con LPS, sin embargo, cuando se trataron con Poli I:C la expresión sólo aumentó a las 3 horas. En salmón del atlántico se observó una expresión mayor a las 3 horas con LPS,  de  60 veces  de aumento respecto a la condición control, mientras tanto , en células estimuladas con  Poli I:C  la expresión de MHC II aumentó 4 veces respecto al grupo control . Adicionalmente, se observó la morfología de las células de estos cultivos primarios ,  y  se descubrieron varios cúmulos de células  de riñón de salmón del Atlántico a las 12 horas al ser estimuladas con Poli I:C, no hubo dichos cúmulos en células de robalo.  En cambio, con LPS no  se observó una distribución y morfología anormal de los cultivos celulares. E n conclusión, e sta técnica ha permitido realizar ensayos preliminares para evaluar la respuesta inmune en células de riñón frente a componentes propios de patógenos (LPS y Poli I:C), dando luces de cómo es la respuesta de los peces frente a problemas sanitarios ocasionados por patógenos presentes en la acuicultura chilena . Agradecimientos a: Fondecyt 1160877, Fondap-Ideal 15150003.