DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE Streptococcus sp. Y RELACIÓN CON PARÁMETROS FISICOQUÍMICOS EN UN SISTEMA DE PRODUCCIÓN DE TILAPIAS Oreochromis niloticus EN COSTA RICA

La estreptococosis es una enfermedad bacteriana granulomatosa que genera pérdidas económicas en cultivos de tilapia. Es provocada principalmente por Streptococcus agalactiae y S. iniae asociados a mala calidad del agua. El diagnóstico se hace con PCR punto final en aislados de Streptococcus sp., y en tejidos infectados, agua y sedimentos.

Se recolectaron 15 individuos de O. niloticus en cada uno de 30 estanques de tilapia cultivada, disectando hígado, bazo, cerebro y ojos de cada individuo. Se hicieron pools de cada órgano para detectar Streptococcus sp. por PCR punto final con cebadores específicos (gen 16S ARNr para S. agalactiae y gen lactato oxidasa -lctO- para S. iniae). Los productos fueron secuenciados para análisis de taxonomía molecular y topologías filogenéticas. La temperatura, pH y oxígeno se midieron en todos los estanques, en 3 puntos diferentes y se correlacionaron con la presencia de Streptococcus sp. (significancia 0.01). El 60 % (18/30) de los estanques fueron positivos para S. agalactiae y el 46 % (55/120) de todas las muestras fueron positivas para S. agalactiae. No se encontró S. iniae en las muestras analizadas. La identidad del producto de PCR del gen 16S ARNr fue confirmada por posicionamiento taxonómico con secuencias de S. agalactiae (GenBank: MH497587, MH628242, MF113269) (Fig. 1). Hubo una correlación ligeramente positiva y significativa (r = 0.6291, n = 30, P=0.0002) entre temperatura y presencia de S. agalactiae. En contraste, no se observó correlación significativa entre presencia de S. agalactiae con pH (r=-0.0275, n=30, P=0.8851) u oxígeno disuelto (r=-0.2476, n=30, P=0.1870) (Fig. 2). El análisis de PCR punto final en hígado, bazo, cerebro y ojos fue eficaz para detectar S. agalactiae (Abuseliana et al. 2011; Itsaro et al. 2012) y su identidad molecular se confirmó mediante posicionamiento taxonómico de secuencias (Al-Harbi et al. 2016). Hubo una correlación positiva entre la presencia de S. agalactiae y la temperatura del agua muestreada (entre 35 y 40°C) (Kayansamruaj et al., 2014). La mayor frecuencia de brotes ocurren cuando la temperatura sobrepasa los 28°C (Amal et al., 2015). Estos resultados son relevantes en la acuicultura nacional relacionado con la generación y aplicación de herramientas moleculares confiables para el monitoreo epidemiológico en sistemas de producción.